平台介绍
质谱流式(Mass Cytometry)技术是新兴的多维单细胞分析技术,采用金属元素偶联抗体,结合电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)对单细胞上的标签元素进行检测,避免了传统流式的荧光串色、自发荧光以及通道受限等问题。金属元素标记的抗体识别细胞表面或内部的抗原,细胞被逐个送入等离子炬中进行离子化,使得标签金属离子释放出来,释放出的金属离子被送入飞行时间检测室中进行分离检测,检测器会精确记录各种离子到达的时间,进而换算出每个细胞中各种金属标签的精确含量。最后,采用 SPADE、PCA、viSNE 以及 Gemstone 等方法进行分析数据。
(Expert Opin Drug Discov. 2019 Feb;14(2):115-125. )
技术优势
金属标签系统的应用使得IMC技术大大提高了单张切片样本单次实验可以检测的标志物数量,使得用传统方法免疫组化(IHC)需要十几张切片才可以完成的染色操作,现在通过一张切片即可完成,有效地避免了由于连续切片造成的数据间差异,以及连续染色过程中样本的损失,特别是那些临床上多年积累下来的珍贵、稀有临床样本,使它们的价值可以得到最大程度的发掘。同时在已有信息和结论基础上,更易于发现新的现象和结果。
应用领域
IMC技术凭借其多参数的检测优势,可以识别出肿瘤组织中的免疫细胞,并且知道它属于什么亚群,同时也知道它在组织中的位置,周围有哪些细胞与之相互作用。这种定位信息和分类信息的同时获得,在研究肿瘤微环境、肿瘤免疫的精细机制等等领域具有非常重要的意义。进行全面且精细的研究分析,目前已经广泛应用于细胞生物学、分子生物学、免疫学、血液学、药物筛选和研发,临床biomarker开发等领域的研究。
样本要求
切片样本需要用石蜡油密封后4度保存;蜡块样本4度保存
连续切片(Serial sections),便于锁定目标区域
厚度小于等于7μm
组织FFPE样本尽量新鲜,最好是半年以内制作,以石蜡块为佳。